4. REZULTATI IN RAZPRAVA
4.1 IZBIRA ANALITOV TER RAZVOJ IN OPTIMIZACIJA ANALIZNIH
4.3.3 Vrednotenje vsebnosti vitaminov v izbranih kozmetičnih izdelkih
4.3.3.1 Kvalitativno vrednotenje vsebnosti
Razvito analizno metodologijo (metodo UHPLC in ekstrakcijske postopke) smo v nadaljevanju uporabili za analizo izbranih komercialno dostopnih izdelkov z vitamini
B-26
kompleksa na slovenskem trgu. Pri tem smo najprej ugotavljali, ali so navedeni vitamini (oblike vitaminov) prisotni v izdelkih. Neujemanje smo ugotovili pri enem izdelku (2,7 % testiranih izdelkov) (MISS), ki navaja prisotnost vitamina B7, ki ga ob vizualnem pregledu kromatogramov, pri valovni dolžini 210 nm, v KI nismo zaznali (ob tr 10,5 min v kromatogramu ni bilo nobenega kromatografskega vrha). To je lahko posledica dodane minimalne količine vitamina, ki je prenizka za zaznavo, njegove nestabilnosti, ali pa vitamina v izdelek sploh niso dodali.
4.3.3.2 Kvantitativno vrednotenje vsebnosti
Kakovost KI smo lahko ovrednotili z vidika vsebnosti vitaminov B-kompleksa za tiste izdelke, ki imajo navedeno vsebnost. Ker nas je zanimala tudi povezava s ceno oz., ali je mogoče najti cenovno ugodne izdelke z veliko vsebnostjo preiskovanih vitaminov, smo analizirali izdelke s ceno od 0,5 do 120 €/50 mL KI. Testirali smo 37 vzorcev izdelkov, ki smo jih pripravili po postopkih opisanih v poglavjih 3.5.2 in 3.5.3. Rezultati analiz in povezava s ceno za 50 mL izdelka so predstavljeni na Sliki 8 in v Preglednici PIII v prilogi.
Slika 8: Ugotovljene vsebnosti vitaminov B-kompleksa v izbranih KI različnih cen (cena je podana za 50 mL izdelka).
27
Vsebnost vitamina B3 smo določili v 15 izdelkih. Razpon ugotovljenih vsebnosti je bil 0,030 – 11,217 % (m/m), najpogosteje med 2 in 4,5 % (m/m). Na osnovi tega lahko ugotovimo, da je vitamin B3 v KI večinoma (razen pri 2 KI) prisoten v koncentracijah, za katere glede na literaturne podatke pričakujemo, da bodo imele določen učinek na koži. Dermalni nanos KI s 3 % (m/m) niacinamida namreč poveča hidrofobnost in izboljša barieno funkcijo rožene plasti, 5 % (m/m) pa zmanjša porumenelost, rdečico, gubanje kože in hiperpigmentirane pege na obrazu (12, 40).
Največjo vsebnost vitamina B3 smo ugotovili pri treh KI različnih cenovnih skupin: PCN (11,217 % (m/m), 120€/50 mL KI), SKINT (10,145 % (m/m), 37€/50 mL KI) in REV (10,184 % (m/m), 17€/50 mL KI). Najboljše razmerje med vsebnostjo vitamina in ceno ima izdelek REV. Med KI, s ceno nižjo od 5€/50 mL KI, najbolj izstopa LRPLi, ki je z vsebnostjo B3 4,325 % (m/m) zelo cenovno dostopen. Najmanjšo vsebnost vitamina pa imata BALV (0,030 % (m/m)) – kar je pričakovano, saj spada med cenejše izdelke in FRE (0,045 % (m/m)), za katerega bi pričakovali, da bo vsebnost večja, glede na višjo ceno.
Vsebnost vitamina B5 smo ugotavljali v 27 izdelkih. Ugotovljene vsebnosti so bile 0,141 – 5,191 % (m/m), najpogosteje med 0,4 in 1,5 % (m/m). Vitamin B5 je v KI na splošno prisoten v nižjih koncentracijah kot vitamin B3. Ugotovoljeni % (m/m) vitamina B5 v izdelkih pa so glede na literaturne podatke o učinkovitem vlaženju kože pri 1 % (m/m) (41) v večjem številu izdelkov dovolj visoke za njegovo delovanje. Največjo vsebnost vitamina B5 imajo izdelki (različnih cenovnih razredov) THEO (5,191 % (m/m)), BEP1 (5,053 % (m/m)), EUC (5,038 % (m/m)), LRPHY (5,005 % (m/m)), LRPCS (4,987 % (m/m)), G&G (4,980 % (m/m)), LRPCG (4,846 % (m/m)), LRPC (4,817 % (m/m)) in BEP (4,814 % (m/m)) (priloga, Preglednica PIII). Najboljše razmerje med vsebnostjo in ceno smo ugotovili pri KI G&G in EUC, ki sta iz nižjega cenovnega območja (manj kot 5€/50mL KI). KI EUC tako veliko vsebnost vzdržuje še 1 leto po RU, kar kaže na ustrezno formulacijo izdelka. Najmanjša vsebnost vitamina pa je bila ugotovljena pri izdelku višjega cenovnega razreda SKINT (0,141 % (m/m)).
Med izdelki s kombinacijo vitaminov B3 in B5 izstopata izdelka iz višjega cenovnega razreda z navedeno vsebnostjo vitamina B3 (10 %) PCN in SKINT, pri katerih je tudi vsebnost B5
kar visoka (0,254 % (m/m) PCN, 0,141 % (m/m) SKINT) (priloga, Preglednica PIII). Izdelka s kombinacijo obeh vitaminov in še večjo vsebnostjo vitamina B5, (MISS (B3: 2,435 % (m/m), B5: 0,775 % (m/m)) in RIL (B3: 2,254 % (m/m), B5: (1,054 % (m/m))) pa prihajata iz cenovno dostopnejših razredov (MISS 10€/50 mL KI, RIL 17€/50 mL KI). Ker MISS
28
vsebuje še vitamin B12 (0,00088 % (m/m)), bi ga z vidika cene in vsebnosti vitaminov priporočali, vendar smo pri tem izdelku opazili neskladnost pri označevanju, saj dodatno navedenega vitamina B7 nismo zaznali.
RB6 je bil edini testirani izdelek, ki vsebuje vitamin B6. Kot je razvidno iz Preglednice PIII v prilogi, je bila njegova vsebnost 0,557 % (m/m).
V splošnem smo pri vrednotenju vsebnosti vitaminov B-kompleksa v izbranih izdelkih ugotovili, da med ceno in vsebnostjo vitaminov v izdelkih ni povezave, saj ni nujno, da cenejši izdelki vsebujejo manj vitaminov in obratno. Na ceno namreč vplivajo tudi druge prisotne KAS, ostale sestavine in formulacija izdelka, narekuje pa jo tudi znamka izdelka.
Opazili smo tudi podobnost med vsebnostjo istih vitaminov v različnih izdelkih enakega proizvajalca (priloga, Preglednica PIII):
o B5 – DARH (0,480 % (m/m)) in DARI (0,460 % (m/m)); AFYP (0,611 % (m/m)) in AFRT (0,577 % (m/m)); CIE24 (0,526 % (m/m)) in CIEQ10 (0,515 % (m/m)); LRPC (4,817 % (m/m)), LRPCS (4,987 % (m/m)), LRPCG (4,846 % (m/m)), LRPHS (4,427 % (m/m)) in LRPHY (5,005 % (m/m)).
o B3 – LRPTO (2,199 % (m/m)) in LRPT (2,136 % (m/m)).
4.3.3.3 Primerjava med navedeno in ugotovljeno vsebnostjo vitaminov
Na trgu KI se povečuje število izdelkov, ki kvantitativno navajajo vsebnost aktivnih sestavin.
Zaradi nezadostne kontrole pa se navedb na ovojnini ne preverja. Kontrola kakovosti hidrofilnih vitaminov z ugotavljanjem njihovih vsebnosti v KI je bila po dostopnih podatkih izvedena samo za vitamin C in njegove derivate (37). Podobne študije za vitamine B-kompleksa pa nismo zasledili. Kakovost KI smo zato preverjali na izdelkih z navedenim % vsebovanega vitamina. Vsebnost je bila deklarirana pri devetih od 37 testiranih izdelkov:
G&G, BEP, BEP1, THEO, REXN, LRPCS, REV, MABX, PCN (priloga, Preglednica PI).
Vzorce izdelkov smo pripravili po postopkih 3.5.2 in 3.5.3. Na Sliki 9 so predstavljeni rezultati.
29
Slika 9: Primerjave navedene in ugotovljene vsebnosti (z SD-ji) vitaminov B3 in B5 v izbranih KI.
Rezultati vrednotenja vsebnosti B vitaminov dobro korelirajo z navedbami na ovojnini – pri 6 od 9ih izdelkov so odstopanja znotraj 5 %. Pri ostalih treh pa so ugotovljene vsebnosti od navedenih odstopale za več kot 10 %. Odstopanje je bilo največje pri REXN in MABX, kjer je bila ugotovljena vsebnost vitamina B3 le 45,9 % (REXN) in 56,5 % (MABX) navedene.
Manjša vsebnost vitamina je lahko posledica slabše stabilnosti vitamina v izdelku, neustreznega proizvodnega procesa (neupoštevanja dobre proizvodnje prakse) ali pa namernega dodajanja manjše količine vitamina. Pri enem izdelku (PCN) pa smo ugotovili večjo vsebnost od navedene (112,2 %). Najverjetnejši razlog za uporabo prebitkov je neustrezna stabilizacija nestabilnih analitov v izdelkih oz. za nadomeščanje izgub (razgradnja) nestabilnih sestavin tekom RU KI, kar je uveljavljena praksa na področju vitaminskih izdelkov (42, 43). To nam potrjuje tudi predhodna raziskava, kjer so pri 2 izdelkih enakega proizvajalca potrdili nestabilnost vitaminov (retinoidov) oz. neustrezne formulacije z vidika zagotavljanja stabilnosti (44). Opazna je tudi razlika med vitaminoma B3 in B5, saj so bile ugotovljene vsebnosti za vitamin B3 med 45,9 in 112,2 % deklarirane, medtem ko so ugotovljene vsebnosti za vitamin B5 ustrezne (odstopanja od navedb za manj kot 5 %). Največje odstopanje od navedene vsebnosti za vitamin B5 smo zaznali pri izdelku BEP (96,3 %), kar je kljub možni nestabilnosti vitamina (izdelek je bil 2 leti čez RU) znotraj eksperimentalne napake analizne metode.
Na osnovi rezultatov kvantitativnega vrednotenja vitaminov smo ugotovljali tudi skladnost navajanje vrstnega reda sestavin na seznamu. Neresničen vrstni red navajanja vitaminov smo ugotovili pri enem izdelku – FRE; kot je razvidno iz Preglednice PIII v prilogi, je vsebnost vitamina B5 (0,528 % (m/m)) večja kot B3 (0,045 % (m/m)) – naveden vrstni red pa je najprej
30
vitamin B3 nato B5. Ampak zakonodaja dovoljuje poljuben vrstni red navajanja pri sestavinah s koncentracijo < 1 %, zato je to navajanje zakonsko gledano ustrezno.
4.4 STABILNOSTNA ŠTUDIJA
Ugotovljene vsebnosti vitamina B5 so ustrezale navedbam na ovojnini pri vseh testiranih izdelkih, ki kvantitativno navajajo njegovo vsebnost, medtem ko smo za vitamin B3 odkrili odstopanja (navzgor in navzdol). Z namenom razjasnitve teh rezultatov in problematike stabilnosti B vitaminov smo izbrane izdelke izpostavili pogojem za testiranje stabilnosti. Pri tem smo z namenom pospešitve reakcij nestabilnosti in pridobitve informacij o (ne)stabilnosti vitaminov v KI izvedli pospešeno testiranje. Študijo smo izvajali tudi za krajši čas pri sobni temperaturi, da bi ugotovili stabilnost pri dejanskih pogojih shranjevanja in ovrednotili vpliv temperature na stabilnost vitaminov v izdelkih.