DIPLOMSKO DELO

(1)

UNIVERZA V LJUBLJANI

FAKULTETA ZA KEMIJO IN KEMIJSKO TEHNOLOGIJO

DIPLOMSKO DELO

Tjaša Črnilogar

2021

(2)

(3)

UNIVERZA V LJUBLJANI

FAKULTETA ZA KEMIJO IN KEMIJSKO TEHNOLOGIJO VISOKOŠOLSKI ŠTUDIJSKI PROGRAM KEMIJSKA

TEHNOLOGIJA

Sinteza novih triazolidinov in njihovih srebrovih(I) koordinacijskih spojin

DIPLOMSKO DELO

Tjaša Črnilogar

MENTOR: doc. dr. Jakob Kljun

Ljubljana, 2021

(4)

(5)

IZJAVA O AVTORSTVU

diplomskega dela

Spodaj podpisana Tjaša Črnilogar sem avtor diplomskega dela z naslovom: Sinteza novih triazolidinov in njihovih srebrovih(I) koordinacijskih spojin.

S svojim podpisom zagotavljam, da:

 je diplomsko delo rezultat mojega raziskovalnega dela pod mentorstvom doc. dr.

Jakoba Kljuna;

 sem poskrbela, da so dela in mnenja drugih avtorjev, ki jih uporabljam v predloženem diplomskem delu, navedena oziroma citirana v skladu z navodili;

 se zavedam, da je plagiatorstvo, v katerem so tuje misli oziroma ideje

predstavljene kot moje lastne, kaznivo po zakonu (Zakon o avtorskih in sorodnih pravicah – uradno prečiščeno besedilo (ZASP-UPB3) (Ur. list RS, št. 16/2007);

 sem poskrbela za slovnično in oblikovno korektnost diplomskega dela;

 je elektronska oblika diplomskega dela identična tiskani obliki diplomskega dela.

V Ljubljani, dne Podpis avtorice:

(6)

(7)

Zahvala

Za strokovno pomoč, nasvete in vodenje pri izdelavi diplomskega dela se zahvaljujem mentorju doc. dr. Jakobu Kljunu.

Posebna zahvala gre mojim družinskim članom, ki so mi skozi celoten študij nudili podporo in verjeli vame.

Zahvalo bi rada posvetila tudi Katji in Branki za pomoč, skupno učenje in lepe trenutke tekom študijskih dni.

Hvala knjižničarjem, za pomoč pri iskanju gradiva.

Hvala Ani, za pomoč pri izvedbi praktičnega dela diplomske naloge.

(8)

(9)

Sinteza novih triazolidinov in njihovih srebrovih(I) koordinacijskih spojin

Povzetek: Namen diplomske naloge je bil pripraviti nove spojine, narediti karakterizacijo sintetiziranih produktov, preučiti potencialno aplikacijo snovi in predlagati nove sintezne postopke. V okviru diplomskega dela sem preučila sintezne postopke za triazolidine in naredila tri nove ligande, ki sem jih okarakterizirala z jedrsko magnetno resonanco (NMR) in masno spektrometrijo (HRMS). Raziskala sem potencialno aplikacijo triazolidinov in srebrovih kompleksov, zapisala lastnosti srebrovih soli in opisala sinteze 1:1 srebrovih kompleksov. V sklepnem poglavju sem predlagala sintezne postopke za 1:1 komplekse s srebrom in sintetiziranim ligandom.

Ključne besede: srebro, 1,2,4-triazolidin-3-tion, srebrovi kompleksi

Synthesis of new triazolidines and their silver(I) coordination compounds

Abstract: The purpose of my thesis was to prepare and characterize new compounds, to study their potential use and suggest new synthesis protocols. As part of a thesis the known synthetic protocols for triazolidines are described and three new compounds were synthesized. The new compounds were characterized by NMR analysis and mass spectrometry. The potential use of triazolidines and silver complexes, the properties of silver complexes and the synthetic protocols of 1:1 silver complexes are described. The synthesis of 1:1 complexes with silver and synthesised ligand are proposed.

Keywords: silver, 1,2,4-triazolidne-3-thione, silver complex

(10)

(11)

Kazalo

1 Uvod ... 1

2 Namen dela ... 2

3 Materiali in metode ... 3

3.1 Sintezne metode za pripravo 1,2,4-triazolidin-3-tionov ... 3

3.1.1 Primeri katalizatorjev in sinteznih postopkov ... 3

3.2 Potencialna aplikacija 1,2,4-triazolidin-3-tionov ... 8

3.2.1 Protibakterijska in protimikrobna učinkovitost ... 8

3.2.2 Zaviralci AChE – Acetilholinesteraze ... 8

3.2.3 Spontana ciklizacija tiosemikarbazonov ... 9

3.3 Potencial srebrovih kompleksov za farmacevtske in veterinarske aplikacije. 10 4 Eksperimentalni del ... 13

4.1 Uporabljene kemikalije... 13

4.2 Splošni sintezni postopek ... 13

4.2.1 Sinteza 5-(1,1'-bifenil-4-il)-2,5-dimetil-1,2,4-triazolidin-3-tiona ... 13

4.2.2 Sinteza 4-(1,3-dimetil-5-tiokso-1,2,4-triazolidin-3-il)benzonitrila ... 14

4.2.3 Sinteza 2,5-dimetil-5-(4-nitrofenil)-1,2,4-triazolidin-3-tiona ... 15

4.3 Metode karakterizacije in analitika... 17

4.3.1 Jedrska magnetna resonanca (NMR) ... 17

4.3.2 Masna spektroskopija visoke ločljivosti (HRMS) ... 17

4.4 Načrtovanje sintez kompleksov Ag ... 18

4.4.1 Reaktivnost in fizikalno kemijske lastnostni Ag soli ... 18

4.4.2 Koncept nekoordinirajočih anioniov ... 19

4.4.3 Zgradba in lastnosti ligandov za sintezo ternarnih kompleksov... 19

4.4.4 Pregled literature za sintezne postopke z modelnimi ligandi ... 20

4.5 Sheme in predlagani postopki sintez z novo sintetiziranim ligandom ... 23

4.5.1 Predlog sinteze kompleksa [Ag(phen)(L)](NO3) ... 23

4.5.2 Predlog sinteze kompleksa [Ag(phen)(L)](CF3SO3) ... 23

(12)

4.5.3 Predlog sinteze kompleksa [Ag(L)PPh3]NO3 ... 24

4.5.4 Predlog sinteze kompleksa [Ag(L)PPh3Cl] ... 25

5 Zaključek ... 27

6 Literatura ... 28

7 Priloge ... 31

(13)

(14)

Kazalo slik

Slika 1: Struktura tiamin hidroklorida. ... 3

Slika 2: Sinteza 5-fenil-1,2,4-triazolidin-3-tiona. ... 4

Slika 3: Struktura DMAP. ... 4

Slika 4: Shema katalizatorja [C16MPy]AlCl3Br. ... 5

Slika 5: Struktura [2-HMPyBSA]HSO4. ... 5

Slika 6: Sinteza spiro-1,2,4-triazolidin-3-tiona. ... 6

Slika 7: Struktura PEG. ... 6

Slika 8: Sinteza 5-(4-hidroskifenil)-1,2,4-triazolidin-3-tiona. ... 7

Slika 9: Hidroliza acetilholina. ... 8

Slika 10: Spojina z najboljšo inhibitorno aktivnostjo. ... 9

Slika 11: Struktura tiosemikarbazona (levo) in njegovega izomera triazolidin-3-tiona (desno). ... 9

Slika 12: Potencialne učinkovine za zdravljenje mastitisa. ... 12

Slika 13: Sinteza 5-(1,1'-bifenil-4-il)-2,5-dimetil-1,2,4-triazolidin-3-tiona. ... 14

Slika 14: Sinteza 4-(1,3-dimetil-5-tiokso-1,2,4-triazolidin-3-il)benzonitrila. ... 15

Slika 15: Sinteza 2,5-dimetil-5(4-nitrofenil)-1,2,4-triazolidin-3-tiona. ... 16

Slika 16: Struktura bipy. ... 19

Slika 17: Struktura phen. ... 20

Slika 18: Struktura PPh3. ... 20

Slika 19: Ciklični derivati tiosečnine... 21

Slika 20: Predlog za sintezo kompleksa [Ag(phen)(L)](NO3). ... 23

Slika 21: Predlog za sintezo kompleksa [Ag(phen)(L)](CF3SO3)... 24

Slika 22: Predlog za sintezo kompleksa [Ag(L)PPh3]NO3. ... 25

Slika 23: Predlog za sintezo kompleksa [Ag(L)PPh3Cl]. ... 26

Slika 24: ¹H NMR spekter liganda TC20-01 posnetega v CDCl3. ... 31

(15)

(16)

(17)

Seznam uporabljenih kratic

AChE acetilholinesteraza Bipy bipiridin

CDCl3 devterirani kloroform DCM diklorometan

DEF N,N-dietilformamid

DMAP N,N -dimetilpiridin-4-amin

ESI-HRMS visokoločljivostna masna spektrometrija z elektrorazprševanjem (angl.

electrospray ionization – high resolution mass spectrometry)

IC50 polovica največje inhibitorne koncentracije (angl. half maximal inhibitory concentration)

Imzt imidazolidin-2-tion

L 5-(1,1'-bifenil)-2,5-dimetil-1,2,4-triazolidin-3-tion

MRSA proti meticilinu odporni Staphylococcus aureus (angl. Methicillin-resistant Staphylococcus aureus)

NMR jedrska magnetna resonančna spektroskopija (angl. Nuclear magnetic resonance) PE polietilen

phen fenantrolin PEG polietilen glikol PPh3 trifenilfosfin RT sobna temperatura

TLC tankoplastna kromatografija (angl. Thin-layer chromatography) 2D dvodimenzionalno

(18)

(19)

3D tridimenzionalno

(20)

(21)

1

1 Uvod

Danes je načrtovanje in sinteza dušikovih heterocikličnih spojin z žveplo vsebujočimi funkcionalnimi skupinami zaradi njihove potencialne biološke aktivnosti velik, zahteven in zanimiv izziv za znanstvenike.^[1] 1,2,4-Triazole že najdemo v nekaterih protivirusnih zdravilih, komercialnih produktih, ki delujejo protiglivično, antiepileptično in zaviralcih aromataze s protirakavim delovanjem. Spojine s 1,2,4-triazolnim strukturnim fragmentom masovno uporabljajo tudi za proizvodnjo barvil, za fotografske materiale in kot korozijske inhibitorje.^[2] V nadaljevanju sem predstavila sintezne postopke za pripravo nasičenih analogov triazolov, 1,2,4-triazolidinov, praktično izvedene sinteze in karakterizacijo dobljenih produktov. Srebrove komplekse preučujejo kot nove protibakterijske, protitumorske, protiglivične učinkovine.^[3] V nadaljevanju sem opisala njihove lastnosti in potencialno uporabo v farmaciji in veterini. Srebrove komplekse in triazolidine lahko združimo v 1:1 komplekse, za katere sem v nadaljevanju, na podlagi modelnih spojin, predlagala sintezne postopke.

(22)

2

2 Namen dela

Namen diplomske naloge je bil preučiti sintezne metode za pripravo 1,2,4-triazolidin-3- tionov in njihovih srebrovih kompleksov, pri čemer sem se osredotočala na binarne in ternarne komplekse, v katerih sta srebrov ion in triazolidinski ligand v množinskem razmerju 1:1. Preučiti sem želela modelne reakcije strukturno podobnih ligandov s srebrovimi zvrstmi in predlagati sintezne postopke za pripravo analognih kompleksov, ki imajo 1,2,4-triazolidin-3-tionski fragment za vezavo.

(23)

3

3 Materiali in metode

3.1 Sintezne metode za pripravo 1,2,4-triazolidin-3-tionov

Najenostavnejši sintezni postopki za 1,2,4-triazolidin-3-tione so reakcije aldehidov ali ketonov s tiosemikarbazidi ob prisotnosti katalizatorjev (sulfaminske kisline H3NSO3, N,N-dimetilpridin-4-amina, [C16MPy]AlCl3Br, [(Py)2SO][HSO4], [HMPBSA]HSO4, glicin nitrat) v organskih topilih (glicerolu, etanolu).^[2]

Novejše raziskave se osredotočajo na energijsko učinkovitejše sinteze, ki ne zahtevajo dolgega segrevanja, omogočajo uporabo okolju prijaznejših topil, se izogibajo toksičnih katalizatorjev in uporabljajo lažje dostopne in cenovno ugodnejše surovine.^[2]

3.1.1 Primeri katalizatorjev in sinteznih postopkov

 VB1 (tiamin hidroklorid)

Tiamin hidroklorid, poznan kot vitamin B1, (Slika 1) je zelo učinkovit, biorazgradljiv, cenovno dostopen, netoksičen katalizator, ki je topen v vodi. Namenjen je sintezam (Slika 2) 1,2,4-triazolidin-3-tionov iz strukturno raznovrstnih substratov kot so: aril aldehidi, ciklični ketoni, aril ketoni, izatini s tiosemikarabazidom v vodnem mediju.^[2]

Slika 1: Struktura tiamin hidroklorida.

(24)

4

Slika 2: Sinteza 5-fenil-1,2,4-triazolidin-3-tiona.

 DMAP (N,N -dimetilpiridin-4-amin)

DMAP (Slika 3) je zelo učinkovit nukleofilni katalizator, ki je precej toksičen. Ni biorazgradljiv, potrebno je preprečiti izpuščanje v okolje in uporabljati varovalno opremo.^[4] Prednosti sinteze sta, da poteka v vodnem mediju in da filtrat lahko znova uporabimo za sintezo.^[5]

Slika 3: Struktura DMAP.

Najbolj optimalni pogoji za reakcijo z DMAP so sobna temperatura, vodni medij in 20 mol % katalizatorja. V drugih topilih reakcija ne poteka (toluen, dioksan, diklorometan, kloroform) ali pa je izkoristek mnogo slabši (etanol). Reakcijski pogoji so primerni tudi za sintezo 1,2,4-triazolidin-3-tionov z aril aldehidi in heterocikličnimi aldehidi.^[5]

● [C16MPy]AlCl3Br

Novejši, učinkovit katalizator (Slika 4) v obliki ionske tekočine. Namenjen je okolju prijazni sintezi 1,2,4-triazolidin-3-tionov z aldehidi in tiosemikarbazidom. Katalizator deluje kot surfaktant. Že pri sobni temperaturi v vodnem mediju naredi micele/agregate s hidrofilno glavo in hidrofobnim repom, centralni anion (AlCl3Br^-) je Lewisova kislina.^[6]

(25)

5

Slika 4: Shema katalizatorja [C16MPy]AlCl3Br.

 [(Py)2SO][HSO4]2

Katalizator v obliki kislinske ionske tekočine se uporablja za sintezo spiro-1,2,4- triazolidin-3-tionov iz ketona in tiosemikarbazida v etanolu. Reakcija je enostavna in dokaj hitra, zaradi ponovne uporabe filtrata je okolju prijaznejša.^[7]

Keton cikličen ali acikličen (1 mmol), tiosemikarbazid (1 mmol) in [(Py)2SO][HSO4]2

(10 mol %) reagiramo v etanolu (5 mL) pri sobni temperaturi in mešanju. Po koncu reakcije je produkt prefiltriran in spran z etanolom. Filtrat lahko uporabimo ponovno, segrevati ga je potrebno 2 uri pri 70 °C v vakuumu. Postopek lahko ponovimo najmanj petkrat. Reakcijski čas je 60 min, izkoristek reakcije je 89 %.^[7]

 [2-HMPyBSA]HSO4

Brønstedova kislinska ionska tekočina [2-hidroksimetilpiridin butansulfonska kislina]HSO4 (Slika 5) se uporablja za hitro sintezo spiro-1,2,4-triazolidin-3-tionov iz izatina in tiosemikarbazida.^[8]

Slika 5: Struktura [2-HMPyBSA]HSO4.

Izbran izatin (1 mmol), tiosemikarbazid (1 mmol) in [2-HMPyBSA]HSO4 (20 mol %) reagiramo v vodi (5 mL) (Slika 6). Po končani reakciji je produkt prefiltriran in spran z etanolom. Čas reakcije je med 7 in 15 min, izkoristek reakcije je med 78 in 91 %.^[8]

(26)

6

Slika 6: Sinteza spiro-1,2,4-triazolidin-3-tiona.

● Brez katalizatorja, PEG

Polietilen glikol – PEG (Slika 7) se uporablja kot okolju prijaznejša alternativna topilom, saj ni toksičen in je biorazgradljiv, dobro se meša v vodnih in organskih topilih. Pri sintezah je zelo dobrodošlo, da ni potrebno uporabiti katalizatorja, saj so tako sinteze cenejše in produkti čistejši.^[9]

Slika 7: Struktura PEG.

Aromatski aldehid / tereftalaldehid / keton / aldehid (2 mmol), tiosemikarbazid (2 mmol) (pri tereftalaldehidu 4 mmol) raztopimo v PEG-400 (0,5 mL) in mešamo pri 80 °C 8 min, izkoristek reakcije je 95 % (Slika 8).^[9]

(27)

7

Slika 8: Sinteza 5-(4-hidroskifenil)-1,2,4-triazolidin-3-tiona.

(28)

8

3.2 Potencialna aplikacija 1,2,4-triazolidin-3-tionov

3.2.1 Protibakterijska in protimikrobna učinkovitost

Derivati triazola so zaradi obsežnih zdravilnih in farmacevtskih lastnosti med najpomembnejšimi spojinami v heterocikličnimi kemiji. Derivate 1,2,4-triazola temeljito preučujejo v farmakologiji in agrokemiji, raziskave biološke aktivnosti kažejo na antibakterijsko, analgetično, protirakavo, protivnetno, protiglivično, citotoksično, antidepresivno in protitumorsko delovanje.^[1]

Na podlagi številnih študij je dokazana tudi izjemna paleta bioloških aktivnosti 1,2,4- triazolidin-3-tionov. Dokazali so protirakavo, proti-HIV, protimikobakterijsko, protivirusno, protiepileptično, protialergijsko, protidepresivno in analgetično delovanje.

Delujejo tudi kot zaviralci ogljikove anhidraze, encima, ki je odgovoren za pretvorbo ogljikovega dioksida v hipotetično ogljikovo kislino.^[1]

3.2.2 Zaviralci AChE – Acetilholinesteraze

Acetilholin je nevrotransmiter. Acetilholinesteraza je encim, ki katalizira razpad sproščenega acetilholina v hitrostnem okviru manj kot ene milisekunde (Slika 9). Vloga encima je esencialna v skeletnem nevromuskularnem stičišču in omogoča delovanje sinapse. Encim AChE je običajno sintetiziran v živcih, mišicah in v določenih krvotvornih matičnih celicah. Zaviralci AChE zavirajo razpad acetilholina in se uporabljajo za zdravljenje Alzheimerjeve bolezni, miastenije gravis, glaukoma, atonije gladkih mišic in različnih motenj v funkcijah avtonomnega živčnega sistema.^[10]

Slika 9: Hidroliza acetilholina.

S testiranjem inhibitorne aktivnosti za AChE so dokazali, da so 1,2,4-triazolidin-3-tioni potencialna zdravila, saj imajo nekateri sintetizirani produkti odlično aktivnost s precej nižjo vrednostjo IC50 kot standardno zdravilo Neostigmin. Pomembno vlogo igra položaj vezanih elektron-donorske in elektron-akceptorske skupine, saj je od tega odvisna učinkovitost interakcije z encimom. Spojine, ki imajo vezano donorsko hidroksilno skupino na fenilni del in poleg tega še akceptorsko skupino – nitro skupino, brom ali klor, so pokazale nižje vrednosti IC50 kot tiste, ki so imele na fenilni del vezano zgolj

(29)

9

hidroksilno skupino. Najnižje vrednosti pa so dosegle tiste spojine z di-substituirano akceptorsko skupino poleg hidroksilne skupine na fenilnem delu (Slika 10), kar ne velja za spojino z vezano nitro skupino.^[1]

Slika 10: Spojina z najboljšo inhibitorno aktivnostjo.

3.2.3 Spontana ciklizacija tiosemikarbazonov

Tiosemikarbazone sintetiziramo z reakcijo med tiosemikarbazidom in ketonom ali aldehidom, njihova struktura je zelo aktivna in ima pestro koordinacijsko kemijo.

Triazolidin-3-tioni so ciklični izomeri tiosemikarbazonov. V naši raziskovalni skupini smo opazili, da pride do spontane ciklizacije spojin pripravljenih iz 2- metiltiosemikarbazida.^[11] Ker je to ponovljiva in učinkovita sinteza želimo po istem postopku pripraviti knjižnico spojin s strukturno raznolikimi substituenti.

Slika 11: Struktura tiosemikarbazona (levo) in njegovega izomera triazolidin-3-tiona (desno).

(30)

10

3.3 Potencial srebrovih kompleksov za farmacevtske in veterinarske aplikacije

Srebro se že več stoletij uporablja za različne medicinske namene. V preteklosti so ga uporabljali za dezinfekcijo, proti bakterijskim okužbam in za celjenje ran. Uporabljali so ga v obliki anorganskih soli in kompleksov (npr. srebrov nitrat, srebrov sulfadiazin) in v kombinaciji s proteini. Vse te spojine imajo nekatere slabosti, zaradi katerih je uporaba v klinične namene omejena. Problematično je prehajanje v telo preko kože in slaba stabilnost zaradi hitre tvorbe kompleksa z drugimi fiziološko prisotnimi ligandi. Sam srebrov kation nima velikega vpliva na celice sesalcev in je relativno malo toksičen, zato so raziskave usmerjene v iskanje novih srebrovih kompleksov za farmacevtsko uporabo.^[3] Ionizirano srebro ima protimikrobno delovanje, med tem ko je čisto kovinsko srebro praktično inertno.^[12]

Aktivnost srebrovih kationov je odvisna od njegove biološke dostopnosti, torej sposobnosti prehajanja v tarčno celico, topnosti, ionizacije vira srebra in prisotnosti bioloških ligandov npr. proteinov, klorida, sulfidov.^[3] Protimikrobna učinkovitost srebrovih(I) kompleksov je odvisna od lipofilnosti, redoks potenciala, topnosti in hitrosti sproščanja srebrovih ionov. Vsi ti parametri so odvisni od kemijskih lastnosti ligandov, ki so koordinirani na Ag(I) ione.^[13] Srebrovi kompleksi z N-heterocikličnimi karbeni (NHC-Ag) imajo okrepljeno antibakterijsko in proti rakavo delovanje zaradi sinergističnega vpliva - povečane lipofilnosti kompleksa, kar omogoča lažje prodiranje skozi lipidno membrano in deaktivacijo aktivnih encimskih mest mikroorganizma ali rakave celice. Biološka aktivnost snovi je odvisna od dolžine substituiranih alifatskih verig in števila srebrovih centrov v organokovinski spojini. Hkrati pa višje koncentracije kloridnih anionov lahko povečajo občutljivost na srebro, saj ob pristnosti visokih koncentracij klorida postane bolj biološko dostopno, ker se formirajo topne anionske spojine v obliki AgCl2-.^[3]

Srebrove komplekse preučujejo kot nove protibakterijske, protitumorske, protiglivične učinkovine. Glede na prisotne ligande jih razvrstimo v več razredov in sicer: Ag(I)-NHC komplekse, Ag(I)-karboksilatne komplekse, Ag(I)-N-ligand komplekse, Ag(I)-P-ligand komplekse in Ag(I) mešane komplekse. Praktično vsi kažejo povečano aktivnost v primerjavi z njihovimi prostimi ligandi, kjer še ni bilo kelatno vezanih srebrovih ionov.

Nekateri med njimi so celo pokazali boljše antibakterijsko, protitumorsko, protiglivično delovanje kot klinično uporabljena srebrova zdravila. Največ raziskav je namenjenih Ag(I)-NHC kompleksom, kjer pa se je izkazalo, da je nekaj funkcionalnih skupin močno vplivalo na toksičnost kompleksov, zato so potrebne raziskave v smeri zmanjšane toksičnosti in večje aktivnosti. Mehanizem delovanja kemoterapevtikov še ni povsem

(31)

11

jasen, hkrati pa je pri zdravljenju tumorjev problematična relativno nizka selektivnost med normalnimi in tumorskimi celicami.^[3]

Ag(I)-NHC kompleksi so bili primarno uporabljeni kot katalizatorji, šele kasneje so jih začeli preučevati v farmacevtske namene. Zaradi relativno močne vezi med Ag(I) in ogljikom so te spojine uporabne za različne aplikacije. Že zelo zgodaj so odkrili protimikrobno delovanje, učinkovito delovanje proti visoko odpornim bakterijam in patogenom; najbolj učinkoviti so bili srebrovi kompleksi s karbeni na osnovi imidazola.

Poleg tega imajo nekateri kompleksi sposobnost prehajanja preko lipidne membrane, kar omogoča visoko aktivnost proti sevom Gram-pozitivnih in Gram-negativnih bakterij.

Potencialno te spojine lahko pripomorejo k razvoju novih, učinkovitih antibiotikov proti bakterijam in glivam, ki so razvile odpornost proti obstoječim antibiotikom.

Antibakterijska aktivnost je bila potrjena proti E. coli, S. aureus (MRSA) in številnim drugim bakterijam z razvito rezistenco. Prav tako so dokazali citotoksičnost na rakavih celicah, kjer kompleksi v celicah sprožijo apoptozo, brez primarne nekroze. Delujejo tudi protitumorsko in dosegajo visoko učinkovitost, posledično so potencialno uporabni v zdravilih za zdravljenje raka.^[3]

Srebro je vezano v komplekse iz katerih se na obolelem mestu počasi sproščajo kationi in preprečujejo ponovno kontaminacijo. Najbolj aktivni so aromatski N-heterociklični in NHC kompleksi. V raziskavi naše raziskovalne skupine v sodelovanju s partnerji z univerz v Beogradu in Kragujevcu smo uporabili piridin-4,5-dikarboksilatne ligande za sintezo srebrovih(I) kompleksov, ki so potencialno protimikrobno sredstvo za patogene, ki povzročajo vnetje vimena – mastitis. To je kompleksna in pogosta bolezen krav mlekaric, kjer pride do vnetja mlečnih žlez. Zdravljenje je težavno zaradi konstantnega razvoja patogenov, ki razvijejo rezistenco na konvencionalne antibiotike. Patogene so izolirali iz mleka okuženih krav, sintetizirali pet novih kompleksov in preizkusili protimikrobno učinkovitost. Izkazalo se je, da so srebrovi(I) kompleksi s piridin-4,5- dikarboksilati učinkovite antimikrobne spojine, ki imajo potencialno aplikacijo v zdravljenju mastitisa pri govedu.^[13]

(32)

12

Slika 12: Potencialne učinkovine za zdravljenje mastitisa.^[14]

(33)

13

4 Eksperimentalni del

Izvedla sem več sintez 1,2,4-triazolidinov z različnimi reagenti. Tri sinteze so bile uspešne, potekla je spontana reakcija ciklizacije produkta. Potek sintez in reagenti so opisani v nadaljevanju. Reakcije sem spremljala s pomočjo tankoplastne kromatografije – TLC.

4.1 Uporabljene kemikalije

Reagenti: 96 % etanol, tehnična HCl, 2-metiltiosemikarbazid, 4-acetilbifenil, 4- acetilbenzonitril, 4-nitroacetofenon.

4.2 Splošni sintezni postopek

Zatehtala sem 1,0 mmol 2-metiltiosemikarbazida v bučko z debelimi stenami, mu dodala 5,0 mL etanola in 1,0 mmol izbranega acetofenona. Dobro sem premešala in dodala kapljico tehnične HCl. Segrevala sem 3 ure pri 110 °C. Naredila TLC analizo reakcijske zmesi, s katero sem preverila koliko reaktantov je še bilo prisotnih. Enako sem storila po 4 in 5 urah segrevanja pri enakih pogojih. Po 5 urah so bili prisotni zgolj še sledovi izhodnih spojin. Reakcijo sem ustavila in reakcijsko zmes pustila na sobni temperaturi, da se je ohladila in da je izhlapelo nekaj topila. Zmes sem prelila v kristalizirko in postavila na ledeno kopel, da je izkristaliziralo čim več produkta. Nastala je oborina.

Produkt sem prefiltrirala in sprala s kapalko mrzle mešanice dietiletra:EtOH 1:1. Produkte sem sušila 1 uro pri 45 °C in suhe stehtala.

Produkte in izhodni spojini sem pripravila za NMR analizo. V cevko za NMR sem zatehtala 5,0 mg produkta in dodala 600 µL CDCl3. Postopek sem ponovila za obe izhodni spojini. Če so bili rezultati analize ustrezni, sem produkt pripravila še za masno spektrometrijo.

4.2.1 Sinteza 5-(1,1'-bifenil-4-il)-2,5-dimetil-1,2,4-triazolidin-3-tiona

Reakcijski pogoji: 4-acetilbifenil (1,0 mmol, teoretična masa: 0,1960 g), 2- metiltiosemikarbazid (1,0 mmol, teoretična masa: 0,1052 g), etanol (5,0 mL), kapljica tehnične HCl, 110 °C, 5 h.

(34)

14

TLC: ploščica iz aluminijeve folije, prekrita s plastjo adsorpcijskega materiala, mobilni fazi: 2 % MeOH/DCM in EtOAc/PE 2:1, kapilara za nanos reaktantov in reakcijske zmesi.

Ligand je bil pripravljen po zgoraj opisanem splošnem postopku. Oznaka reakcije: TC20- 01.

Slika 13: Sinteza 5-(1,1'-bifenil-4-il)-2,5-dimetil-1,2,4-triazolidin-3-tiona.

Masa produkta: 0,0777 g, η = 27 %

1H NMR (500 MHz, CDCl3-d): (R=Ph) δ 7.60 (d, J = 14.8 Hz, 6H), 7.45 (s, 2H), 7.37 (s, 1H), 6.66 (s, 1H), 4.68 (s, 1H), 3.36 (s, 3H), 1.78 (s, 3H)

ESI-HRMS: izmerjena vrednost za [M+H]⁺ m/z = 284.1214, izračunana vrednost za [M+H]⁺ m/z = 284.1216.

4.2.2 Sinteza 4-(1,3-dimetil-5-tiokso-1,2,4-triazolidin-3-il)benzonitrila

Reakcijski pogoji: 4-acetilbenzonitril (1,0 mmol, teoretična masa: 0,1452 g), 2- metiltiosemikarbazid (1,0 mmol, teoretična masa: 0,1052 g), etanol (5,0 mL), kapljica tehnične HCl, 110 °C, 5 h.

TLC: ploščica iz aluminijeve folije, prekrita s plastjo adsorpcijskega materiala, mobilni fazi: 2 % MeOH/DCM in EtOAc/PE 2:1, kapilara za nanos reaktantov in reakcijske zmesi, ustreznejša mobilna faza EtOAc/PE 2:1.

(35)

15

Slika 14: Sinteza 4-(1,3-dimetil-5-tiokso-1,2,4-triazolidin-3-il)benzonitrila.

1H NMR (500 MHz, CDCl3-d): (R=CN) δ 7.75 (s, 1H), 7.67 (s, 4H), 4.73 (s, 1H), 3.32 (s, 3H), 1.75 (s, 3H)

ESI-HRMS: izmerjena vrednost za [M+H]+ m/z = 233.0856, izračunana vrednost za [M+H]+ m/z = 284.0855.

4.2.3 Sinteza 2,5-dimetil-5-(4-nitrofenil)-1,2,4-triazolidin-3-tiona

Reakcijski pogoji: 4-nitroacetofenona (1,0 mmol, teoretična masa: 0,1652 g), 2- metiltiosemikarbazida (1,0 mmol, teoretična masa: 0,1052 g), etanol (5,0 mL), kapljica tehnične HCl, 110 °C, 5 h.

TLC: ploščica iz aluminijeve folije, prekrita s plastjo adsorpcijskega materiala, mobilni fazi: 2 % MeOH/DCM in EtOAc/PE 2:1, kapilara za nanos reaktantov in reakcijske zmesi, ustreznejša mobilna faza 2 % MeOH/DCM.

(36)

16

Slika 15: Sinteza 2,5-dimetil-5(4-nitrofenil)-1,2,4-triazolidin-3-tiona.

1H NMR (500 MHz, CDCl3): (R=NO2) δ 8.26 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 7.70 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 6.67 (s, 1H), 4.74 (s, 1H), 3.32 (s, 3H), 1.79 (s, 3H)

ESI-HRMS: izmerjena vrednost za [M+H]⁺ m/z = 253.0757, izračunana vrednost za [M+H]⁺ m/z = 253.0754.

(37)

17

4.3 Metode karakterizacije in analitika

4.3.1 Jedrska magnetna resonanca (NMR)

NMR spektri ¹H in so bili posneti s spektrometrom Bruker Avance III 500 MHz na Fakulteti za kemijo in kemijsko tehnologijo UL. Spektre sintetiziranih produktov je posnela doktorska študentka Jerneja Kladnik. Posneti so bili v kloroformu CDCl3-d, pri 500 MHz in obdelani v programu za urejanje spektrov.

4.3.2 Masna spektroskopija visoke ločljivosti (HRMS)

Spektre HRMS je posnela Damijana Urankar s spektrometrom Agilent 6224 Accurate Mass TOF LC Mass Spectrometer na Fakulteti za kemijo in kemijsko tehnologijo UL.

(38)

18

4.4 Načrtovanje sintez kompleksov Ag

4.4.1 Reaktivnost in fizikalno kemijske lastnostni Ag soli

Uporabljene srebrove soli glede na njihovo kemijsko reaktivnost in fizikalne lastnosti v grobem lahko razdelimo na srebrove halide, vodotopne srebrove soli in srebrove soli z nekoordinirajočimi anioni.

 Srebrovi halidi

Srebrovi halidi so fotosenzibilni. V vodi je dobro topen zgolj AgF, ostali so slabo topni (AgCl>AgBr>AgI).^[15] AgI je najslabše topen od vseh srebrovih halidov in dosega topnost 25x10^-6 g/L pri 60 °C.^[16] AgF, AgCl in AgBr kristalizirajo v strukturi NaCl s kubično ploskovno centrirano osnovno celico.^[15]

Srebrov(I) klorid ima kemijsko formulo AgCl, z molekulsko maso 143,32 g/mol.^[17] Je fotosenzibilna, bela kristalinična snov.^[18]

Srebrov(I) fluorid ima kemijsko formulo AgF z molekulsko maso 126,867 g/mol. Je rumenkasto-siva kristalinična snov brez vonja.^[19]

Srebrov(I) bromid ima kemijsko formulo AgBr z molekulsko maso 187,77 g/mol. Je mehka, svetlo rumena snov.^[15]

Srebrov(I) jodid ima kemijsko formulo AgI z molekulsko maso 234,773 g/mol. To je svetlo rumen prah brez vonja. Kristalna struktura je odvisna od temperature, kristali so heksagonalni ali kubični. Topen je v vodnih raztopinah kalijevega jodida, natrijevega klorida, kalijevega cianida, amonijevega hidroksida in natrijevega tiosulfata.^[16]

● Druge vodotopne srebrove soli in (srebrov(I) nitrat, sulfat)

Srebrov(I) nitrat ima kemijsko formulo AgNO3 z molekulsko maso 169,873 g/mol. To je bela ali brezbarvna kristalinična snov, brez vonja. Občutljiv je na svetlobo, potemni, če je izpostavljen svetlobi ali organskim materialom. Oblika aniona je trikotna planarna. Je zelo dobro topen v vodi.^[20]

Srebrov(I) sulftat ima kemijsko formulo Ag2SO4 z molekulsko maso 311,8 g/mol. Je trdna, belo-siva snov in se raztaplja v vodi.^[21]

● Srebrove soli z nekoordinirajočimi anioni (perklorat, triflat, tetrafluoroborat, heksafluorofosfat)

(39)

19

Srebrov(I) perklorat ima kemijsko formulo AgClO4 z molekulsko maso 207,32 g/mol.^[22]

Zelo dobro je topen v vodi in v aromatskih topilih, je higroskopen. Perklorat je šibko koordiniran anion, ima tetraedrično strukturo. Njegova uporaba je vse redkejša zaradi eksplozivnosti perklorata.^[23]

Srebrov(I) tetrafluoroborat ima kemijsko formulo AgBF4 z molekulsko maso 194,68 g/mol. To je bela trdna snov, ki se raztaplja v vodi in polarnih organskih topilih.

Tetrafluoroboratni (BF4-) anioni imajo tetraedrično strukturo.^[24]

Srebrov(I) heksafluorofosfat ima kemijsko formulo AgPF6 z molekulsko maso 252,832 g/mol. Topen je tudi v manj polarnih organskih topilih. Heksaflurofosfatni (PF6-) anioni imajo oktaedrično strukturo.^[25]

Srebrov(I) trifluorometansulfonat (trilfat) ima kemijsko strukturo AgCF3SO3 z molekulsko maso 256,937 g/mol.^[26]

4.4.2 Koncept nekoordinirajočih anioniov

Med šibko koordinirane anione uvrščamo ClO4-, BF4-, PF6- in triflat. To so kompleksni anioni, ki so šibki nukleofili, slabši donorji elektronskega para in šibkejše Lewisove kisline.^[27]

Srebrove soli slabo koordinirajočih anionov imajo številne aplikacije, uporabljajo jih za oksidacije, metateze in katalitske reakcije. Srebrove(I) soli so običajno higroskopične in fotosenzibilne. Pripravljajo jih z reakcijo vodotopne soli (natrijeve, kalijeve, amonijeve) šibko koordiniranega aniona in srebrovega nitrata v vodnem mediju.^[28]

4.4.3 Zgradba in lastnosti ligandov za sintezo ternarnih kompleksov

 bipy (2,2'-Bipiridin)

Je bela kristalinična snov z molekulsko maso 156,18 g/mol (Slika 16). Je bidentatni ligand, ki tvori komplekse s številnimi prehodnimi kovinami.^[29]

Slika 16: Struktura bipy.

(40)

20

 phen (1,10-Fenantrolin)

Je bela kristalinična snov z molekulsko maso 180,2 g/mol (Slika 17). Topen je v organskih topilih. Je bidentatni ligand, ki tvori močne komplekse s kovinami.^[30]

Slika 17: Struktura phen.

● PPh3 (Trifenilfosfin)

Je bela kristalinična snov z molekulsko maso 262,3 g/mol. Topen je v kloroformu, benzenu in etru, netopen je v vodi. Je monodentatni ligand, ki tvori komplekse s kovinami.^[31]

Slika 18: Struktura PPh3.

4.4.4 Pregled literature za sintezne postopke z modelnimi ligandi

Tiosečnina in njeni ciklični derivati so strukturno podobne spojine 1,2,4-triazolidin-3- tionom. Predvidevamo lahko, da bodo naši ligandi s kovinskimi ioni reagirali po podobnem mehanizmu. Imidazolidin-2-tion je modelna spojina, je cikličen derivat tiosečnine. Podobno kot 1,2,4-triazolidin-3-tion ima pet-členski obroč z dvojno vezjo in nanj vezano žveplo, le v strukturi obroča ima zgolj dva dušikova atoma. Povezuje ju skupna lastnost eksocikličnega žvepla, ki je sposobno koordinacije s številnimi kovinami.

Kot anionski ligand je sposoben mostovne koordinacije N, S. Vez C=S omogoča številne

(41)

21

prostorske razporeditve in načine vezave – s kovino se lahko veže pod številnimi koti, lahko tvori vijačnico ali neplanarno strukturo v različnih konfiguracijah.^[32]

Slika 19: Ciklični derivati tiosečnine.

Sinteza kompleksa polimernega [Ag(1,3-imidazolidin-2-tion)Br]n poteka v epruveti z 8 ml DEF (N,N-dietilformamid), kamor dodamo 0,5 mmol AgBr in 1 mmol 1,3- imidazolidin-2-tiona. Ko se AgBr raztopi, epruveto položimo v steklenico z 10 mL Et3N.

Steklenico zapremo in jo damo v zamrzovalnik na - 2 °C. Brezbarvni kristali [Ag2(1,3- imidazolidin-2-tion)6]SO4 se pojavijo v roku enega meseca, ko hlapi trietilamina prehajajo v raztopino z DEF. Kristale nato odfiltriramo in jih pustimo, da se posušijo na sobni temperaturi. Kristale sestavljajo kationi [Ag(1,3-imidazolidin-2-tion)3]⁺ in anioni SO42-. Aniona SO42- ni v reaktantih, najbolj verjetno pride do oksidacije žvepla v imidazolidinu. Če matičnico pustimo 1 mesec v čaši pri sobni temperaturi se pojavijo brezbarvni kristali, ki jih odfiltriramo in pustimo, da se posušijo na sobni temperaturi.

Tvori se 2D polimerna diamantna struktura, kjer je srebro koordinirano z dvema S atomoma dveh različnih molekul imidazolidina in dvema Br^- anionoma. Po enakem postopku kot [Ag2(1,3-imidazolidin-2-tion)6]SO4 lahko pripravimo tudi kloridni analogni kompleks [Ag(1,3-imidazolidin-2-tion)Cl]n, le, da pri sintezi uporabimo 0,5 mmol AgCl.

Tvori se 3D polimer, kjer je srebro koordinirano z dvema S atomoma dveh različnih molekul imidazolidina in dvema Cl^- anionoma. Pri obeh kompleksih lahko opazimo, da pride do koordinacije halogena na srebro, medtem ko pri reakcijah z nekoordiniranim anionom SO42- pride do interakcij preko vodikovih vezi z imidazolno skupino.^[32]

Pri sintezah binarnih 1:1 kompleksov torej pride do tvorbe 2D in 3D polimernih struktur, saj se kovinski ioni in ligandi povezujejo s koordinacijskimi in kovalentnimi vezmi v eni, dveh ali treh smereh. Ob zapolnitvi koordinacijske sfere kovinskega iona z dodatnimi ligandi pa lahko pripravimo izolirane molekule.

Pri sintezah ternarnih 1:1:1 kompleksov pride do tvorbe kompleksov, ki so stabilni v prisotnosti zraka in svetlobe. Sinteza [Ag(phen)(imzt)](NO3) poteka tako, da 0,37 mmol

(42)

22

1,10-fenantrolina monohidrata raztopimo v 10 mL CH3CNin ga dodamo raztopini 0,37 mmol AgNO3 v 10 mL CH3CN, nastane rumena suspenzija. Raztopini mešamo 10 min in nato dodamo raztopino 0,37 mmol imidazolidin-2-tiona v 10 mL CH3CN. Reakcijsko zmes mešamo 15 min, produkt izoliramo s filtracijo in ga speremo z mrzlim kloroformom, ki ga odstranimo z vakuumom. Po enakem postopku poteka tudi sinteza kompleksa [Ag(phen)(imzt)](CF3SO3), kjer sta izhodni spojini 0,39 mmol 1,10-fenantrolina monohidrata in 0,45 mmol AgCF3SO3, ki v CH3CN tvorita belo suspenzijo. Dodamo jima 0,41 mmol imidazolidin-2-tiona. Produkt izoliramo s filtracijo in ga speremo z mrzlim metanolom, ki ga odstranimo z vakuumom.^[33]

Sinteza [Ag(imzt)PPh3]NO3 poteka tako, da naredimo raztopino 1:1 AgNO3 in PPh3 v 10 mL metanola in 15 mL acetonitrila in ji dodamo en ekvivalent imidazolidin-2-tiona raztopljenega v 15 – 20 mL metanola. Raztopino mešamo 30 minut in jo prefiltriramo, filtrat ohladimo, da izkristalizira oborina. Izoliramo kristale in jih posušimo.^[34]

Sinteza [Ag(imzt)PPh3]Cl poteka tako, da 10 mmol AgCl raztopimo v 2 do 3 mL metanola, mu dodamo 10 mmol trifenilfosfina raztopljenega v 2 do 3 mL metanola.

Suspenzijo refluktiramo 4 ure. Dodamo 10 mmol imidazolidin-2-tiona, nato refluktiramo še 5 ur. Produkt izoliramo s filtracijo.^[35]

(43)

23

4.5 Sheme in predlagani postopki sintez z novo sintetiziranim ligandom

Po zgledu sinteze z modelno spojino predlagam sintezo kompleksa z novo sintetiziranim ligandom 5-(1,1'-bifenil-4-il)-2,5-dimetil-1,2,4-triazolidin-3-tiom (L).

4.5.1 Predlog sinteze kompleksa [Ag(phen)(L)](NO3)

Sintezo [Ag(phen)(L)](NO3) bi izvedli tako, da bi 0,37 mmol (73,3 mg) 1,10-fenantrolina monohidrata raztopili v 10 mL CH3CN in ga dodali raztopini 0,37 mmol (62,8 mg) AgNO3 v 10 mL CH3CN. Pričakujemo nastanek rumene suspenzije. Suspenzijo bi mešali 10 min in nato dodali raztopino 0,37 mmol (104,9 mg) 5-(1,1'-bifenil-4-il)-2,5-dimetil- 1,2,4-triazolidin-3-tiona (L) v 10 mL CH3CN. Reakcijsko zmes bi mešali 15 min, produkt izolirali s filtracijo in ga sprali z mrzlim kloroformom.

Slika 20: Predlog za sintezo kompleksa [Ag(phen)(L)](NO3).

4.5.2 Predlog sinteze kompleksa [Ag(phen)(L)](CF3SO3)

Po enakem postopku bi lahko pripravili tudi kompleks [Ag(phen)(L)](CF3SO3), kjer bi kot izhodni spojini uporabili 0,39 mmol (77,3 mg) 1,10-fenantrolina monohidrata in 0,45 mmol (115,62 mg) AgCF3SO3, ki v CH3CN tvorita belo suspenzijo. Dodali bi jima 0,41 mmol (116.2 mg) liganda L. Produkt bi izolirali s filtracijo in ga sprali z mrzlim metanolom.

(44)

24

Slika 21: Predlog za sintezo kompleksa [Ag(phen)(L)](CF3SO3).

4.5.3 Predlog sinteze kompleksa [Ag(L)PPh3]NO3

Kompleks [Ag(L)PPh3]NO3 bi lahko sintetizirali tako, da bi naredili raztopino 1 mmol (169,9 mg) AgNO3 in 1 mmol (262,3 mg) PPh3 v 10 mL metanola in 15 mL acetonitrila ter dodali 1 mmol (283,4 mg) liganda L raztopljenega v 15 – 20 mL metanola. Raztopino bi mešali 30 minut in jo prefiltrirali, filtrat ohladili, da bi izkristalizirala oborina. Izolirali bi kristale in jih posušili.

(45)

25

Slika 22: Predlog za sintezo kompleksa [Ag(L)PPh3]NO3. 4.5.4 Predlog sinteze kompleksa [Ag(L)PPh3Cl]

Kompleks [Ag(L)PPh3Cl] bi lahko sintetizirali tako, da bi 10 mmol (1,44 g) AgCl raztopili v 2 do 3 mL metanola, mu dodali 10 mmol (2,62 g) trifenilfosfina raztopljenega v 2 do 3 mL metanola. Suspenzijo bi refluktirali 4 ure. Dodali bi še 10 mmol (2,83 g) liganda L in refluktirali še 5 ur. Produkt bi izolirali s filtracijo.

(46)

26

Slika 23: Predlog za sintezo kompleksa [Ag(L)PPh3Cl].

(47)

27

5 Zaključek

V okviru diplomske naloge sem predstavila različne metode za sintezo 1,2,4-triazolidin- 3-tionov in po postopku naše raziskovalne skupine sintetizirala tri nove ligande. Kljub analognem sinteznem postopku so bile uspešne zgolj tri sinteze od petih. Produkti so bili okarakterizirani z jedrsko magnetno resonanco in masno spektrometrijo. V nadaljevanju sem se ukvarjala z načrtovanjem srebrovih kompleksov. Opisala sem lastnosti srebrovih soli in ligandov za sintezo ternarnih kompleksov. Pri sintezah srebrovih soli s šibko koordiniranimi in neekodinirajočimi anioni dobimo prost kovinski center kompleksa, izberemo mono- in bidentatne ligande, ki tvorijo komplekse s kovinami. V sklepnem poglavju sem na podlagi sinteznih postopkov z modelno spojino predlagala sintezne postopke za ternarne srebrove komplekse z novo sintetiziranim ligandom. Predpostavila sem, da 1,2,4-triazolidin-3-tion zaradi podobnih strukturnih lastnosti reagira po podobnem mehanizmu kot modelna spojina imidazolidin-2-tion. Uspešnost predlaganih reakcij bo potrjena po izvedbi v laboratoriju.

V diplomskem delu sem predstavila tudi potencialno uporabo triazolidinov in srebrovih kompleksov. 1,2,4-Triazolidin-3-tioni imajo protibakterijsko in protimikrobno delovanje, dokazali pa so tudi protirakavo, protivirusno, analgetično in protialergijsko delovanje, hkrati so potencialna zdravila za zaviranje acetilholinesteraze. Srebrove komplekse preučujejo kot nove zdravilne učinkovine, Ag(I)-NHC kompleksi so potencialna zdravila za zdravljenje raka. V veterini so srebrovi(I) kompleksi potencialno protimikrobno sredstvo za patogene, ki povzročajo mastitis pri kravah mlekaricah. Srebrovi kompleksi bodo uporabljeni kot pomožne snovi za vezavo na bakterijske encime, ki razgrajujejo antibiotike. S predlaganimi sintezami za srebrove komplekse smo tako korak bližje glavnem namenu študije – s pomožnimi snovmi odpraviti rezistenco bakterij na že obstoječe antibiotike.

(48)

28

6 Literatura

[1] P. G. Mahajan, N. C. Dige, B. D. Vanjare, H. Raza, M. Hassan, S. Y. Seo, C. H.

Kim, K. H. Lee: Synthesis and Biological Evaluation of 1,2,4-Triazolidine-3- Thiones as Potent Acetylcholinesterase Inhibitors: In Vitro and in Silico Analysis through Kinetics, Chemoinformatics and Computational Approaches. Mol. Div.

2020, 24, 1185–1203.

[2] P. J. Patil, G. D. Salunke, M. B. Deshmukh, S. P. Hangirgekar, D. R. Chandam, S.

A. Sankpal: Thiamine Hydrochloride Catalyzed Synthesis of 1,2,4-Triazolidine-3- Thiones in Aqueous Medium. ChemistrySelect 2019, 4, 13071–13078.

[3] X. Liang, S. Luan, Z. Yin, M. He, C. He, L. Yin, Y. Zou, Z. Yuan, L. Li, X. Song, et al.: Recent Advances in the Medical Use of Silver Complex. Eur. J. Med. Chem.

2018, 157, 62–80.

[4] 4-(Dimethylamino)pyridine ReagentPlus®, >= 99 % | 1122-58-3 | Sigma-Aldrich https://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/aldrich/107700?lang=en&region=

SI (dostop Oct 15, 2020).

[5] D. A. Mali, V. N. Telvekar: Synthesis of Triazolidines and Triazole Using DMAP.

Synth. Commun. 2017, 47, 324–329.

[6] J. D. Patil, D. M. Pore: AlCl3Br: An Efficient Novel Ionic Liquid for Synthesis of Novel 1,2,4-Triazolidine-3-Thiones in Water. RSC Adv. 2014, 4, 14314–14319.

[7] P. B. Patil, J. D. Patil, S. N. Korade, S. D. Kshirsagar, S. P. Govindwar, D. M.

Pore: An Efficient Synthesis of Anti-Microbial 1,2,4-Triazole-3-Thiones Promoted by Acidic Ionic Liquid. Res. Chem. Intermed. 2016, 42, 4171–4180.

[8] S. N. Korade, J. D. Patil, D. M. Pore: Novel Task-Specific Ionic Liquid for Room Temperature Synthesis of Spiro-1,2,4-Triazolidine-3-Thiones. Monatsh. Chem.

2016, 147, 2143–2149.

[9] R. Ramesh, A. Lalitha: PEG-Assisted Two-Component Approach for the Facile Synthesis of 5-Aryl-1,2,4-Triazolidine-3-Thiones under Catalyst-Free Conditions.

RSC Adv. 2015, 5, 51188–51192.

[10] Z. R. P Taylor, S Camp: Acetylcholinesterase; Elsevier Ltd.,: University of California at San Diego, La Jolla, CA, USA, 2009; pp 5–7.

[11] A. Gruden: Magistrsko Delo, Sinteza Rutenijevih Kompleksov s Tiosemikarbazoni, Univerza v Ljubljani, Fakulteta za kemijo in kemijsko tehnologijo, 2020.

[12] Y. Dror, C. Ophir, A. Freeman: Silver-Enzyme Hybrids as Wide-Spectrum Antimicrobial Agents. Adv. Wound Caref 2019, 293–307.

(49)

29

[13] T. P. Andrejevic, D. Milivojevic, B. Glišic, J. Kljun, N. L. Stevanovic, S. Vojnovic, S. Medic, J. Nikodinovic-Runic, I. Turel, M. I. Djuran: Silver(I) Complexes with Different Pyridine-4,5-Dicarboxylate Ligands as Efficient Agents for the Control of Cow Mastitis Associated Pathogens. Dalton Trans. 2020, 49, 6084–6096.

[14] Metal based compounds as drugs against many diseases - Turel group website http://ruturel.fkkt.uni-lj.si/metal-based-compounds-drugs-many-diseases/ (dostop Apr 6, 2021).

[15] Silver bromide - Wikipedia https://en.wikipedia.org/wiki/Silver_bromide (dostop Nov 17, 2020).

[16] Silver Iodide | AgI - PubChem

https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/24563#section=Experimental- Properties (dostop Nov 17, 2020).

[17] Silver chloride | AgCl - PubChem

https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/24561 (dostop Nov 17, 2020).

[18] Silver chloride - Wikipedia https://en.wikipedia.org/wiki/Silver_chloride (dostop Nov 17, 2020).

[19] Silver fluoride | AgF - PubChem

[20] Silver nitrate | AgNO3 - PubChem

[21] Silver sulfate | Ag2SO4 - PubChem

[22] Silver perchlorate | AgClO4 - PubChem

[23] Silver perchlorate - Wikipedia https://en.wikipedia.org/wiki/Silver_perchlorate (dostop Nov 17, 2020).

[24] Silver tetrafluoroborate - Wikipedia

https://en.wikipedia.org/wiki/Silver_tetrafluoroborate (dostop Nov 17, 2020).

[25] Hexafluorophosphate - Wikipedia

https://en.wikipedia.org/wiki/Hexafluorophosphate (dostop Nov 17, 2020).

[26] Silver trifluoromethanesulfonate - Wikipedia

https://en.wikipedia.org/wiki/Silver_trifluoromethanesulfonate (dostop Nov 17, 2020).

[27] B. Čeh: Spošna in Anorganska Kemija; UL, Fakulteta za kemijo in kemijsko tehnologijo: Ljubljana, 2015.

(50)

30

[28] C. Jenne, B. Wegener: Silver Salts of the Weakly Coordinating Anion [Me 3 NB 12 Cl 11 ] -. Z. Anorg. Allg. Chem. 2018, 644, 1123–1132.

[29] 2,2’-Bipyridine | C10H8N2 - PubChem

https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/2_2_-Bipyridine (dostop Nov 17, 2020).

[30] 1,10-Phenanthroline | C12H8N2 - PubChem

[31] Triphenylphosphine | (C6H5)3P - PubChem

[32] Q. Zhu, R. Huang, K. Lu, L. Dong, C. Hu: Anion-Directed Assembly of Metal- Organic Coordination Complexes from 1,3-Imidazolidine-2-Thione Ligand and Silver Salts. Inorganica Chim. Acta 2009, 362, 4943–4952.

[33] P. F. Espuri, L. L. dos Reis, E. de Figueiredo Peloso, V. S. Gontijo, F. A. Colombo, J. B. Nunes, C. E. de Oliveira, E. T. De Almeida, D. E. S. Silva, J. Bortoletto, et al.: Synthesis and Evaluation of the Antileishmanial Activity of Silver Compounds Containing Imidazolidine-2-Thione. J. Biol. Inorg. Chem. 2019, 24, 419–432.

[34] A. A. Isab, S. Nawaz, M. Saleem, M. Altaf, M. Monim-ul-Mehboob, S. Ahmad, H. S. Evans: Synthesis, Characterization and Antimicrobial Studies of Mixed Ligand Silver(I) Complexes of Thioureas and Triphenylphosphine; Crystal Structure of {[Ag(PPh3)(Thiourea)(NO3)]2·[Ag( PPh3)(Thiourea)]2(NO3)2}.

Polyhedron 2010, 29, 1251–1256.

[35] N. O. Al-Zamil, K. A. Al-Sadhan, A. A. Isab, M. I. M. Wazeer, A. R. A. Al-Arfaj:

Silver(I) Complexes of Imidazolidine-2-Thione and Triphenylphosphines: Solid- State, Solution NMR and Antimicrobial Activity Studies. Spectrosc. 2007, 21, 61–

67.

(51)

31

7 Priloge

Slika 24: ¹H NMR spekter liganda TC20-01 posnetega v CDCl3.

(52)

32

(53)

33